感染组较未感染组显著提高了15d肉鸡盲肠总厌氧菌含量(P<0.05),感染组加4g/kg二甲酸钾较未感染组显著提高了15d肉鸡盲肠大肠杆菌含量(P<0.05);无论感染或未感染,添加4g/kg二甲酸钾较阴性对照组均显著降低了35d肉鸡肌胃乳酸杆菌及空肠大肠杆菌和产气荚膜梭菌含量(P<0.05)。感染阳性对照组和未感染阴性对照组较其他感染组均显著提高15d肉鸡十二指肠和空肠pH(P<0.05),未感染阳性对照组较其他组显著提高了15d肉鸡回肠pH(P<0.05)。二甲酸钾可以通过增加体重和降低死亡率在一定条件下缓解肉鸡生长性能的下降。
坏死性肠炎是由革兰氏阳性菌(产气荚膜梭菌)引起的一种全球性家禽疾病,会引起肉鸡群体死亡率升高,并以亚临床形式降低鸡的生长性能,这两种结果都损害了动物福利,给鸡肉生产带来很大的经济损失。在实际生产中,通常在饲料中加入抗生素以预防坏死性肠炎的发生,但目前饲用抗生素禁用的呼声越来越高,需要其他方案来代替抗生素的预防作用。McDevitt等(2006)研究发现,在日粮中添加有机酸或其酸盐能抑制产气荚膜梭菌含量,从而降低坏死性肠炎的发生。二甲酸钾在肠道中分解成甲酸和甲酸钾,由于共价键性对温度,有一部分甲酸完整进入小肠。本试验以感染坏死性肠炎鸡肉为研究模型,研究二甲酸钾对其生长性能、肠道微生物和短链脂肪酸含量的影响。
1 材料与方法
1.1 试验设计
试验选择1日龄肉仔鸡924只,随机分为7组,每组6个重复,每个重复22只鸡,7个试验组分别是:未感染阴性对照组、未感染+4g/kg二甲酸钾、感染阴性对照组、感染+45mg/kg杆菌肽锌(感染阳性对照组)、感染+2或4或6g/kg二甲酸钾。试验从1d进行到35d,试验日粮组成及营养成分见表1.。试验1~7d及16~21d对各组进行称重,每天记录鸡只的死亡数量,试验结束后计算各阶段日均采食量、日增重、饲料报酬和全期死亡率。
1.2 组织样品收集及分析
分别在试验第15和35天每个重复随机选择3只鸡进行屠宰,收集肌胃、十二指肠、空肠、回肠和盲肠内容物,-20℃保存。用pH计测定各组织内容物pH,参考Jensen等(1995)的方法测定短链脂肪酸含量及Miller和Wolin(1974)的方法分析各内容物总厌氧菌、乳酸菌、大肠杆菌和产气荚膜梭菌的含量。
表1试验日粮原料组成及营养水平分析

注:复合多维多矿为每千克饲料提供,3.5mg维生素A,0.10mg维生素D3,2mg维生素K,30mg维生素E,2mg维生素B1,5mg维生素B2,0.012mg维生素B1250mg烟酸,15mg泛酸,2mg叶酸,5mg吡哆醇,0.1mg生物素。80mg锰,60mg锌,8mg铜,1.2mg碘,0.3m钴,0.1mg硒,0.1m乙氧基喹啉。
1.3 统计分析
试验数据采用SAS软件单因素方差分析模型,用Tukery法进行多重比较,以P<0.05表示组间差异显著。
2 结果与分析
2.1 二甲酸钾对感染坏死性肠炎肉鸡生长性能的影响
由表2可知,与未感染的阴性对照组相比,感染阳性对照组显著提高了肉鸡1~35d日增重和饲料报酬(P<0.05)。未感染的二甲酸钾组、未感染阴性对照组和感染阳性对照组对1~21d肉鸡日增重和饲料报酬无显著影响(P>0.05),但所有的二甲酸钾组较未感染阴性对照组或感染的阳性对照组均显著降低了日增重和饲料报酬(P<0.05)。感染坏死性肠炎的鸡只较未感染组均显著提高了肉鸡的死亡率(P<0.05),但添加二甲酸钾较感染阴性对照组显著降低了死亡率(P<0.05)。
表2试验日粮对肉鸡生长性能和死亡率的影响

2.2 二甲酸钾对感染坏死性肠炎肉鸡组织器官微生物含量的影响
由表3可知,各组对15d肉鸡肌胃和空肠微生物含量无显著影响(P>0.05),但感染组较未感染组显著提高了盲肠大肠杆菌含量(p<0.05).。
由表4可知,感染的阴性对照组较感染组加4g/kg二甲酸钾组显著提高了35d肉鸡肌胃产气荚膜梭菌含量(P<0.05)。无论感染或未感染,添加4g/kg二甲酸钾较阴性对照组均显著降低了35d肉鸡肌胃乳酸杆菌及空肠大肠杆菌和产气荚膜梭菌含量(P<0.05)。
表3试验日粮对15 d肉鸡组织器官微生物含量的影响 lg cfu/g

表4试验日粮对35 d肉鸡组织器官微生物含量 的影响 lg cfu/g

2.3 二甲酸钾对感染坏死性肠炎肉鸡组织pH和短链脂肪酸含量的影响
由表5可知,感染阳性对照组和未感染阴性对照组较其他感染组均显著提高15d肉鸡十二指肠和空肠pH(P<0.05)。未感染阳性对照组较其他组显著提高了15d肉鸡回肠pH(P<0.05)。
表5试验日粮对15 d肉鸡组织pH和短链脂肪酸含量的影响

由表6可知,各组对35d肉鸡组织器官短链脂肪酸含量无显著影响(P>0.05),但未感染的较感染的鸡只有提高回肠乙酸及空肠和回肠乳酸的趋势(P=0.06,P=0.08)。
表6试验日粮对35 d肉鸡组织pH和短链脂肪酸含量的影响

3.1 二甲酸钾对感染坏死性肠炎肉鸡生长性能的影响
本试验结果发现,二甲酸钾无论对感染或未感染坏死性肠炎肉鸡的生长性能均无显著影响,这与Hernandez等(2006)的研究结果一致,其用同等剂量的甲酸钙发现对肉鸡日增重和料比无显著影响,但当甲酸钙添加量到15g/kg时显著降低了肉鸡生长性能(Patten和Waldroup,1988)。然而,Selle等(2004)的研究结果发现,日粮添加6g/kg二甲酸钾可以提高显著提高16~35d肉鸡增重和采食量。目前关于有机酸对预防坏死性肠炎感染的研究报道不多。本试验发现,日粮添加4g/kg二甲酸钾可以显著降低肉鸡的死亡率,但死亡率的降低与二甲酸钾的添加量未表现出剂量-效应关系。
3.2 二甲酸钾对感染坏死性肠炎肉鸡组织器官微生物含量的影响
饲料中添加45mg/kg杆菌肽锌降低了感染坏死性肠炎肉鸡的死亡率,同时伴随着降低空肠产气荚膜梭菌含量,这与Kocher等(2004)的研究结果一致。日粮二甲酸钾添加剂量对15d感染坏死性肠炎肉鸡空肠产气荚膜梭菌含量无显著影响。Walsh等(2004)发现,高系酸力日粮对有机酸具有负面作用,因此,高蛋白日粮的高系酸力可能会降低二甲酸钾对坏死性肠炎的预防作用。本试验还发现,二甲酸钾提高了35d肉鸡肌胃乳酸杆菌含量,这与Knarreborg等(2002)在体外发现二甲酸钾降低猪胃中乳酸杆菌的生长不一致。
3.3 二甲酸钾对感染坏死性肠炎肉鸡组织pH和短链脂肪酸含量的影响
有机酸的抗菌作用被认为主要发生在消化道上半部分,本试验结果发现,二甲酸钾提高了15d十二指肠和35d空肠甲酸含量。Mroz(2005)发现,影响有机酸作用的因素有很多,如饲料pH、缓冲/系酸力和日粮电解质平衡等。日粮低系酸力和高电解质平衡值可以促进二甲酸钾解离成甲酸和甲酸钾,因此,日粮适宜水平的系酸力和电解质平衡值可以提高二甲酸钾对肉鸡生长性能的改善作用以及对坏死性肠炎的预防作用。
4 结论
二甲酸钾对感染坏死性肠炎肉鸡模型的结果发现,二甲酸钾可以通过增加体重和降低死亡率在一定条件下缓解肉鸡生长性能的下降,可作为饲料添加剂控制肉鸡感染坏死性肠炎。