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山羊传染性胸膜肺炎的诊断

发布时间:2016-05-24 16:09    作者:牧通人才网    来源:    查看:
    山羊传染性胸膜肺炎是山羊特有的接触性传染病,以发热、咳嗽,出现浆液性、纤维蛋白渗出性肺炎和胸膜炎为特征。病原为山羊支原体山羊肺炎亚种,是一种细小、多形性的微生物,平均大小为0.3~0.5um,革兰氏染色阴性。专属需氧菌,要有特别的培养基才能生长。 鸡胚卵黄或尿囊均适合于该菌生长。

    1  病理学诊断

   (1)病理剖检变化。病变多局限于胸部。胸腔常有淡黄色液体,有时多至500~2000mL,暴露于空气后发生纤维蛋白凝结。急性病例的损害多为一侧,间或两侧有纤维蛋白性肺炎。肺变区凸出于肺表,颜色由红至灰不等,切面呈大理石样。纤维蛋白渗出液的充盈使得肺小叶间组织变宽,小叶界限明显,支气管扩张。血管内形成血栓。胸膜变厚而粗糙,上有黄白色纤维蛋白附着,直至胸膜与肋膜、心包发生粘连。支气管淋巴结和纵膈淋巴结肿大,切面多汁并有溢血点。心包积液,心肌松弛变软。急性病例还可见肝、脾肿大,胆囊肿胀,肾肿大和被膜下小点溢血。

   (2)病理组织学变化。前驱期的病理变化主要表现为多发性支气管肺炎,在镜检时可在肺炎灶与正常组织之间的间质中见到炎性水肿和淋巴管炎引起的小叶间质扩张。肺炎灶中呼吸细支气管上皮脱落,腔内有多量渗出物,支气管周围的肺泡内有渗出的浆液,嗜中性粒细胞、单核细胞、红细胞及脱落的肺泡上皮细胞、肺泡壁毛细血管充血。临床明显期的病理变化主要表现为纤维素性融合性肺炎和浆液纤维素性胸膜炎。在充血水肿期镜检可见肺泡壁毛细血管高度扩张、充血,肺泡内存有大量染成粉红色的浆液,并有少量红细胞、嗜中性粒细胞及组织细胞等。在红色肝变期镜检可见肺泡内充满大量纤维素,其中混有大量红细胞和数量不等的嗜中性粒细胞、淋巴样细胞和脱落的上皮细胞。肺泡壁的毛细血管高度扩张、充血。灰色肝变期镜检,肺泡内除可见有大量丝网状纤维蛋白外,尚可见嗜中性粒细胞、单核细胞的数量显著增多,肺泡壁毛细血管充血减弱,肺泡内红细胞数量大为减少。在发生坏死时,镜检可见细胞核破碎溶解、胞浆凝固,但坏死细胞和组织轮廓尚能辨认。在肺间质内镜检可见小叶边缘的坏死灶。当血管壁坏死时可见血管壁变性、坏死及其周围浸润细胞发生核崩解,血管内有血栓形成。在间质内出现坏死的同时或稍后,于血管周围和坏死部位可见机化灶出现。镜检可见机化灶中心为一个或几个大小不等的小血管,周围为新生的肉芽组织,其中混有一定数量的白细胞,其外周为透明区,透明区外周为核破碎的坏死区。机化灶是该病特有的病理变化,在病理组织学上具有重要的诊断意义。在肺脏呈现上述病变的同时,一般还可以看到胸膜炎的变化。镜检可见浆膜表面附着有大量纤维素,其中混有一定数量的白细胞。浆膜下炎性水肿,淋巴管扩张、淋巴栓形成,血管炎和血栓形成,胶原纤维呈纤维素样坏死。

    2  血清学诊断

    常用的方法有琼脂免疫扩散试验、玻片凝集试验和荧光抗体试验等。直接免疫荧光试验操作方法如下。

   (1)材料准备。器材有荧光显微镜、载玻片、盖玻片、温箱及滴管等,荧光抗体(FA)由指定单位供应。

   (2)操作方法。荧光抗体效价测定。准备8支小试管,第1管加 PBS 1.8mL,其余7管每管加PBS 1mL。向第1管加荧光抗体0.2mL,混合后从中取1mL加到第2管,以后由此类推。得到1∶10~1∶1280不同对倍稀释的荧光抗体。然后取长好单个菌落的与抗血清相对应的支原体琼脂平皿培养物,加入约5mL的PBS,置室温下半小时,吸弃PBS,再用铲刀切取琼脂培养物8块,每块约lcm²,分置于载玻片上。另准备平皿,放入湿滤纸,将两根玻棒平行放在湿滤纸上,再将有琼脂块的载玻片搁在玻棒上。然后将8个不同稀释度的荧光抗体分别滴到8个琼脂块上,每块1~2滴,并作稀释度的标记,盖上平皿盖。置室温下半小时,取出平皿,用PBS轻洗琼脂表面,用入射式光源显微镜找到菌落,再用汞灯观察荧光。出现特异性荧光的最高稀释度为该荧光抗体效价,使用时用2倍或4倍的效价。标本片的制备。取长好单个菌落的支原体琼脂平皿培养物加入约5mL的PBS,置室温下半小时,吸弃PBS,再用铲刀切取琼脂培养物,置于载玻片上。染色。将稀释至工作浓度的FA,滴加在标本面上,室温恒湿染色,取PBS轻洗琼脂表面数次,荧光显微镜下观察。

   (3)结果判定。在荧光显微镜下检查,被检标本的细菌结构完整清晰,并在阳性、阴性对照均成立时判定。在菌体中见到特异苹果绿色荧光判定为阳性;如果所有菌体中无特异性荧光,则判定为阴性。

   (靳连平  辽宁省绥中县前卫动物卫生监督所)

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