牛病毒性腹泻是由牛病毒性腹泻病毒引起牛的一种急性、热性传染病，牛感染BVDV后表现为腹泻、进行性消瘦、脱水，严重的导致死亡。BVDV可以引起免疫耐受和免疫抑制，母畜流产和奶牛产奶量下降，每年都给全球养牛业造成巨大的经济损失。为了掌握青海牦牛中BVDV的感染情况，为青海牦牛BVDV的综合防控提供参考依据，本研究对采集于青海省6个规模牦牛饲养场和11户散养户的559份血清样品进行了ELISA抗体检测。
1 材料和方法
（1）2016年3～12月，采集青海省6个规模牦牛饲养场和11户散养户的血清样品共计559份。牛病毒性腹泻病毒ELISA抗体检测试剂盒为美国IDEXX公司产品；ELx800酶标仪为美国BIOtek公司产品。
（2）检测方法。按照牛病毒性腹泻病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书操作，首先在96孔酶标板每个孔加 100μL 样品稀释液，之后检测孔加 25μL 血清样品，阳性对照孔和阴性对照孔各加 25μL 阳性和阴性对照血清，加完后在室温下作用90分钟，之后弃去酶标板液体，每孔加 300μL 洗液洗5次，最后一次洗完拍干。在每个酶标孔加 100μL 酶标抗体，室温下作用30分钟，之后弃去酶标板液体，每孔加 300μL 洗液洗5次，最后一次洗完拍干。每孔加 100μL TMB 底物，室温下避光10分钟显色，之后每孔加 100μL 终止液终止反应，酶标仪在450nm波长读数，记录分析检测结果。
（3）结果判定。按照牛病毒性腹泻病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书要求，阴性对照平均值≤0.25，阳性对照平均值 － 阴性对照平均值≥0.15试验结果成立，计算检测血清样品的S/P值。公式为S/P=样品OD值 － 阴性平均OD值 / 阳性平均OD值 - 阴性平均OD值。S/P≥0.3，检测样品为阳性；S/P＜0.2，检测样品为阴性；0.2≤S/P＜0.3，检测样品为可疑；可疑样品需要重新检测。
2 结果和分析
6个规模养殖场和11户散养户均存在BVDV抗体阳性牛。共计检测559份样品，阳性样品202份，平均阳性率为36.14%。其中，6个规模牦牛场的BVDV血清抗体阳性率最高的为47.27%，最低的为16.67%，平均阳性率为34.19%。11户散养户的BVDV血清抗体阳性率最高的为57.89%，最低的为27.78%，平均阳性率为39.42%。散养户与规模牛场相比，无论是最高阳性率，还是最低阳性率都高于后者，其中散养户的平均阳性率较规模牛场高5.23个百分点。因采集血清样品的牦牛养殖场和散养户牛群均未免疫过BVDV疫苗，该抗体阳性表明均由BVDV野毒感染所致（见表1）。
BVDV是牛群普遍易感的疾病，也是危害养牛业最主重的疾病之一，BVDV抗体普查具有十分重要的意义。通过BVDV抗体普查，可以了解牛群BVDV感染情况。由于该病的临床症状不明显，有时还不表现临床症状，在实际生产中常常不易诊断。从青海牦牛的血清 BVDV 抗体检测结果可以看出，559份血清样品的平均阳性率为36.14%，规模牦牛场的阳性率为34.19%，散养户的阳性率为39.42%，散养户的平均阳性率较规模牛场高5.23个百分点，说明青海牦牛中存在严重的BVDV感染，尤其是散养户牛群的感染状况更为严重。BVDV感染后能够导致该病在牛群中潜伏感染，引起免疫抑制，虽然暂时不发病，但在牛群受到刺激时引发急性发作。建议根据检测结果对牛群进行净化处理，对BVDV抗体阳性的牛逐渐予以淘汰，不能留作种用。本次牛群的血清学调查工作，为今后牛群的净化奠定了基础。
BVDV在牛群中的潜伏感染常常导致该病很难净化。该病可以通过母牛垂直传播，感染BVDV的母牛会出现产死胎及弱仔现象，严重影响规模养牛场的发展。首先要加强对新购牛的检疫，最好坚持自繁自养，对引进的犊牛一定要做好BVDV抗体检测工作，血清抗体检测呈阴性方可饲养。防治BVDV最有效的手段就是牛群净化，将BVDV阳性牛逐步淘汰。同时，加强饲养管理，经常消毒，保持良好的环境卫生，经常清理养牛场的粪便，保持牛舍通风良好。该病重在预防，发病后目前主要采取对症治疗措施，及时补液防止脱水。
（柳清 青海省湟源县畜牧兽医站）
