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猪深部输精技术的类型

发布时间:2014-04-10 18:04    作者:yizhiinfo    来源:畜牧人才网    查看:

    猪深部输精技术的优势在于提高精液产品的利用效率, 那么确定适宜的最低输精量就成为这项技术的关键点。应用这项技术必须考虑2点:①减少输精量要保证输卵管壶腹部有足够的功能精子数与卵子发生受精作用, 避免由于功能精子数量不足, 而发生部分卵细胞受精或不受精的现象, 最终导致产仔数或窝产仔数降低;②要注意虽然输精量减少了,影响最终受胎率的变量因素却增加了, 如有受精能力的精子比率、 公猪的繁殖力、 母猪的管理、 输精时间及这些变量的相关性等, 在生产应用中都需要认真的考虑到。在影响受胎率的变量因素中, 输精时间始终是影响人工授精成功率的重要变量之一, 尤其是输精量减少后, 确定适宜的输精时间对受胎成功非常关键( G a r c i a等, 2 0 0 7; P e l l a n d等, 2 0 0 8) 。由于输入母猪生殖道的精子会发生老化或活力减弱现象, 输精的最佳时间段更为短暂, 而排卵通常发生在发情行为的后期( S o e d e等, 1 9 9 7) , 因此, 为了准确地预测排卵时间, 在生产中首先要准确地监测发情期的开始和持续。如果监测到即将排卵, 可使用外源激素药物进行同步处理。这样可以更加准确地预测排卵时间, 也便于实施一次定时输精, 最终减少生产每头仔猪所需要的精子量。在断奶或应用四烯雌酮处理后, 用马绒毛膜促性腺激素( e q u i n e   c h o r i o n i c   g o n a -d o t r o p i n, e C G) 作用2 4h, 结合人绒毛膜促性腺激素、 猪促黄体激素或促性腺激素释放激素, 作用5 6~8 0h, 是当前准确预测排卵时间最有效的激素处理方案( B r u s s o w等, 2 0 0 9) 。不论输精量为多少, 不管精液采用哪种方法处理, 任何人工授精技术的首要目标是必须保证排卵期输卵管处停驻足够数量的精子, 以保证最佳的受孕效果。深部输精技术在保证受胎率的前提下减少了每次人工授精的输精量, 克服了C A I技术的一些弱点。根据输精部位不同, 猪深部输精技术可分为子宫体( 子宫颈后) 输精( p o s t - c e r v i c a l   o r   i n t r a u t e r -i n e   i n s e m i n a t i o n, I U I) 技术、 子宫角输精( d e e p   i n -t r a u t e r i n e   i n s e m i n a t i o n,DU I) 技 术 和 输卵管 输精( i n t r a - o v i d u c t a l   i n s e m i n a t i o n, I O I) 技术。当需要限制输精量时, 这些都是非常有效的输精技术。


一、 子宫体( 子宫颈后) 输精技术  

     1959年, Han -cock首次报道了I U I技术。该法采用一个比传统输精管长1 5~2 0c m的半刚性的输精装置, 通过一个事先插入子宫颈皱褶的普通导尿管, 将精液输入至距子宫颈1 5~2 0c m处子宫腔内, 输液量通常为3 0m L, 约1 0 0 0×1 06个精子。该技术最大的优点是可减少因精液逆流造成的精子损失, 但无法避免宫体炎性细胞吞噬损耗精子。2 1世纪初, 这项技术在实验室和生产上得到较多的研究和应用。W a t s o n等( 2 0 0 2) 报道了该技术在英国养猪生产上的首次试验应用, 结果表明, I U I技术保留了传统 A I技术操作简单、 高效和安全的特点, 在输精量为1 0 0 0×1 06个精子时, 可获得良好的母猪受胎率。M e z a l i r a等( 2 0 0 5) 将输精量降至5 0 0×1 06个精子, 也获得了相似的结果。但另一些研究和应用却没有如此成功。R o b e r t s等( 2 0 0 5) 研究结果表明, C A I技术输精量为1 0 0 0×1 06个精子时, 显著影响母猪产仔数; 而输精量为5 0 0×1 06个精子时, 产仔数和窝产仔数均显著降低( R o z e b o o m等, 2 0 0 4) 。这些研究结果表明,除了技术因素, 饲养管理、 技术操作、 母猪状况等因素都会影响最后的输精效果, 且不同国家及地区亦有差别, 因此, 良好的饲养管理及规范的输精技术对I U I技术获得好的输精效果至关重要。


二、 子宫角输精技术 

     1999年,Vázquez等在美国贝尔茨维举办的“ 公猪精液保存” 大会上首次介绍了DU I技术。此法所用的输精管长1. 8 0m, 外周直径4mm, 内圈直径1. 8 0mm, 借助先插入的人工授精管, 将精液输送到子宫角部位。影响该技术应用的主要障碍是母猪复杂的生殖道解剖学构造, 包括子宫颈部较厚的肌肉、 子宫褶皱、 发情时子宫颈收缩、 子宫角长度( 1 2 0~1 4 0c m) 及盘曲特性等。最初人们担心这种特制的输精管会造成潜在的子宫黏膜损伤, 影响母猪以后的繁殖力。但很多研究结果表明, 子宫角输精造成的母猪出血率很低, 小于2%,与常规人工授精法相近, 实施子宫角输精前后母猪的繁殖性能无显著变化( G r o s s f e l d等, 2 0 0 5;M a r -t i n e z等, 2 0 0 6;W o n g t a w a n等, 2 0 0 6) ; 此外, B o l a r i n等( 2 0 0 6) 研究结果表明, 实施子宫角输精前后母猪的繁殖性能无显著变化。以上研究结果说明, 只要输精技术操作规范, 子宫角输精法不会影响母猪随后的繁殖性能。采用DU I技术可显著减少每次的输精数, 鲜精输精量能减少2 0倍, 冷冻精液输精量可减少6倍; 使用含有1 5 0×1 06~6 0 0×1 06个精子的稀释鲜精液和含有1 0 0 0×1 06个精子的冻融精液分别对母猪进行子宫角授精, 都获得了成功(M a x -w e l等, 1 9 9 9;V á z q u e z等, 2 0 0 5;R o c a等, 2006) 。此外, 该技术与性控精液的结合使用也获得了成功( Vázquez等, 2008)。


三、输卵管输精法 

    当生产中使用高附加值的性控精液或转基因精液进行人工授精时, 减少人工授精输精量、 提高精液利用效率显得更为迫切和需要( R a t h, 2 0 0 2; J o h n s o n等, 2 0 0 5) 。研究人员考虑直接将精液输送至输卵管部位, 以最大限度地减少输精量, 这种方法称为I O I技术。最初人们采用剖腹手术的方法, 让冻融精子和性控精子直接驻留在输卵管, 使母猪成功妊娠, 但手术法在实际生产中可行性差( J o h n s o n, 1 9 9 1; S c h o e n b e c k等, 1 9 9 5) 。为减少创伤, 通过改进腹腔镜检查术, 研究人员开发了一种腹腔镜微创I O I技术, 该技术借助腹腔镜设备, 通过微创切口, 将精液直接输送至母猪的子宫输卵管结合部位附近或输卵管内( D a y, 2 0 0 0; F a n t i n a t i等,2 0 0 5; V á z q u e z等, 2 0 0 6) 。首先母猪需麻醉, 在母猪腹部近脐窝处切1个1. 5c m的小口, 将带有嵌入式零度腹腔镜的1 2mm  O p t o v i w套管( E t h i c o n   E n d o -s u r g e r y公司, 美国俄亥俄州辛辛那提市) 通过该切口插入母猪腹腔内。然后, 用零度腹腔镜取代O p t i -v i e w探头, 在腹腔内注入C O 2使腹压达到1 4mm汞柱, 将2个辅助端口放在半腹部左右两边, 作为腹腔镜杜瓦尔( D u v a l) 钳状骨针的入口。用杜瓦尔钳状骨针分别控制子宫角和夹紧输卵管, 使输精探针顺利进入。输精后, 移去套管针微创缝合, 整个微创手术的完成时间控制在1 5m i n之内。该技术创伤小,一般通过培训后, 技术人员易掌握和应用。采用I O I技术的输精数通常为0. 3×1 06~0. 6×1 06个精子, 输精数超过1×1 06个精子时, 易发生多精子受精现象。输精时间安排宜在母猪排卵前1~3h, 能降低多精子受精的发生率。I O I技术的出现提高了性控精液等高附加值精液产品的利用效率, 有利于促进性控繁育技术在养猪生产中的推广和应用。

 

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