广西某集约化猪场猪伪狂犬病的监测及净化

     由于有可区别疫苗和野毒感染产生的抗体试剂盒，猪伪狂犬病基因缺失弱毒疫苗的使用为猪场伪狂犬病的净化打下了基础，为该病的控制带来了突破性进展。欧美等养猪大国已经据此完成了伪狂犬病的控制与净化工作，成功地清除了伪狂犬病。现阶段我国各地区的许多集约化猪场也展开伪狂犬病的清除计划，但净化效果参差不齐。本研究应用PRVgE抗体ELISA检测试剂盒，对广西某规模化猪场的伪狂犬病野毒感染情况进行了抽样调查，并根据检测结果制订针对伪狂犬病的净化控制方案。2013年，通过采取严格的防疫方案，对公、母猪3次抽样检测，对临床发病的仔猪进行病原检测，隔离饲养乃至淘汰阳性猪，加强饲养管理等技术措施，一年内使得该猪场的PRV野毒感染率由35.29%逐步降低至0%，成功地控制和净化了伪狂犬病。

     广西省某集约化猪场。将猪群分组：后备母猪、1～3胎母猪、3胎以上母猪、公猪、哺乳仔猪、保育猪、中大猪。根据组群情况，分别抽样5～15份。

     采用某公司的猪伪狂犬病基因缺失弱毒疫苗（gE、TK基因缺失）。

     伪狂犬病gE缺失ELISA诊断试剂盒，购自法国LSI公司；猪伪狂犬病病毒（gE基因）实时荧光PCR检测试剂盒，购自北京世纪元亨公司。

     在2013年的3月、7月和11月各采集血样1次，按照PRVgE抗体检测试剂盒说明书要求检测PRV野毒感染抗体。结果判定：测定各孔的OD450值，INH%=100×（阴性对照OD450均值-样品OD450值）/阴性对照OD450均值。INH%≤40，判为阴性；40＜INH%＜45，判为可疑，需重复检测，如果结果不变，间隔一定时间后再次采样检测；INH%≥45时，判为阳性。

     对疑似PR发病仔猪剖检，采集淋巴结、肺等组织，处理后应用猪伪狂犬病病毒（gE基因）实时荧光PCR检测试剂盒进行病原检测，操作方法按照试剂盒说明书进行。结果判断：被检样品Ct值≤30并出现特定的扩增曲线为PRV野毒阳性，被检样品30＜Ct＜37并出现特定的扩增曲线，需要重新取样提取DNA，扩增后进行结果判定，如仍为可疑，则判定为阳性；被检样品Ct值≥37时，判定为阴性；对于某些未呈现S型曲线，但本底较高的样品，判为阴性。

     2013年3月以来，选用优质高效的某公司的猪伪狂犬病基因缺失弱毒疫苗（gE、TK基因缺失）进行全群免疫。仔猪3日龄内滴鼻免疫，8～9周龄再肌注免疫1次；种公母猪每3个月普免1次，后备母猪配种前免疫2次。

     严格控制人员、车辆出入猪场。加强消毒工作，对出入猪场的人员、车辆严格消毒；对猪舍栏位、猪场内外环境、设施设备及饲养工具进行定期消毒。所有死亡猪只，流产物或死胎等，进行无害化处理。着重加强灭鼠、灭蚊工作，清理猪场杂草。禁止在猪场养犬、猫。根据免疫监测情况对阳性猪只或阳性猪群进行隔离饲养或淘汰。由于猪群阳性率较高，早期不作过分淘汰，而是清除发病猪；当阳性率较低时清除阳性猪。

     坚持自繁自养，并实施严格的“全进全出”饲养制度。保证饲料营养科学全面，确保猪只的营养需求，并定期对猪只进行保健工作。

     从检测结果来看，实施综合防控等净化方案以来，猪群gE野毒抗体的阳性率由首次检测的35.29%降至第3次检测的0%（见表1），说明猪群伪狂犬病野毒抗体逐步转阴，净化初步成功。

     在净化之初，对临床发病的仔猪进行PRV野毒实时荧光PCR检测，结果表明猪场保育猪群呈现感染状态，阳性率达42.86%。开展伪狂犬病净化工作后，猪群群体状态逐步趋于良好。第2次检测时，发病仔猪群伪狂犬病野毒阳性率降至27.27%；到2013年底，猪群状态良好，抽样结果显示阳性率已经为0（见表2），且无疑似伪狂犬病发病仔猪出现。

  

     目前，我国预防猪伪狂犬病主要采取免疫接种的方式，首选疫苗为猪伪狂犬病gE基因缺失疫苗。伪狂犬病gE抗体ELISA检测试剂盒能区分伪狂犬病野毒和疫苗毒所产生的抗体，通过检测可获知猪体是否被伪狂犬病野毒所感染。本研究主要针对广西某伪狂犬病发病猪场采取了必要的防控措施。

     结果表明实施的免疫防控方案以及严格生物安全措施有效地控制和净化该病，使该猪场成为伪狂犬病阴性猪场。为巩固净化效果，必须采取严格的免疫防控措施及合理的后续监测工作，种猪群和后备猪群全面实行监测淘汰制，并配合全进全出、严格引种检疫，做好饲养管理工作，从各个方面切断伪狂犬病的传播途径。

（桂林市蔬菜研究所，蒋建国；广东大华农动物保健品，张显浩，李冰；华南农业大学兽医学院，贺东生）