猪是伪狂犬病病毒(PＲV)的贮存宿主，猪发生伪狂犬病后，其临诊症状因日龄而异，一般报道为成年猪呈隐性感染，怀孕母猪可导致流产、产死胎及木乃伊胎和种猪不育等综合征候群。2013年6月下旬，河南省南阳市某猪场育肥猪群暴发疑似猪伪狂犬疫情，现将诊疗情况报道如下。
1猪场基本情况
南阳市猪场母猪，均为二元品种，存栏200头左右，商品猪约在1000头左右，保育猪320头，哺乳仔猪360头，公猪5头，品种为杜洛克。该场建成已经接近10年，除定位栏、产床、保育床是近2年逐渐改进的，育肥舍仍为敞圈，冬季靠外搭塑料膜取暖，夏季靠淋雨及洒水降温。
2免疫情况
该场曾在2009年底发生过保育猪大批死亡情况，临床解剖症状不一，用自家组织苗控制后，生产成绩上升。猪场处于稳定状态后，完善和制定了种猪和商品猪免疫程序及保健方案。主要调整策略如下:1)种猪在猪瘟、伪狂犬、口蹄疫跟胎接种改为普防，每年3次;乙脑4月份、9月份普防;细小病毒病产后14日龄接种。2)加入进口圆环病毒病、蓝耳病疫苗，每年普防3次。
3发病情况
2013年6月20日，该场有80kg以上的商品猪发烧，采食量急剧下降，因高温，疑为中暑热应激反应。遂对症治疗，效果不好，且有扩散和加剧趋势，死亡率上升，场内所养2只藏獒发病，流延，呼吸急促，呕吐，精神紧张，1～2日后死亡。
4临床症状
体温在40．5～41．5℃之间，食欲废绝，大部分病猪精神沉郁，个别猪只呕吐，腹泻，间歇式神经症状;约有5%左右病猪上嘴唇上翘，呈“似笑非笑”面孔;个别病猪鼻腔不通，张口呼吸，发出“呼嗤”声音。约有30%左右病猪眼脸严重肿胀，部分病猪后期失明。
5病理剖检
急性死亡猪扁桃体仍有外表纹理，质地稍柔软，切开后充鲜血丝，略变淡黄色;2～3日死亡者，扁桃体表面充血，表面纹理消失，略肿胀，颜色发暗，质地略硬，切开后多汁，略浑浊，充血严重;4d以后死亡者，扁桃体严重充血，色暗黑色，色泽不均，质地坚硬，肿胀，切开后坏死、汁稠、纹理消失似淋巴结构。肝脏呈纹理状病变，充血和黄色病变交替，后期病重者肝脏上有大小不一的白色病灶。肾脏变淡，针尖状出血点。肺脏病变不等，部分急性死亡猪消化道浆膜有出血点，慢性病例胃肠道溃疡出血，肠淋巴结阶段性充血肿胀，大部分猪额下淋巴结严重充血肿胀，见图1和图2。
6病理组织学变化
主要表现是中枢神经系统的弥散性非化脓性脑膜脑炎及神经节炎，有明显的血管套及弥散性局部胶质细胞坏死。
7实验室检验
采集三头送检病猪血液，分离血清，进行PCＲ检测。PCＲ试剂盒购自北京世纪元亨公司。
7．1病毒模板DNA的提取
从水浴锅中取出已处理的样品、阴性对照和阳性对照，分别加入600μL酚－氯仿－异戊醇混合液，用力颠倒10次混匀，12000r/min离心10min。取500μL上清液置于灭菌离心管中，加入500μL异丙醇，混匀，－70℃冰箱中放置30min。取出样品管，室温融化，13000r/min离心15min。弃上清液，沿管壁缓缓滴入1mL75%乙醇，轻轻旋转1周后倒掉，将离心管倒扣于吸水纸上1min，50℃烘干。取出样品管，用30μL灭菌去离子水溶解沉淀，作为模板备用。
7．2PCＲ扩增
每份总体积20μL，取16μLPCＲ反应液(用前混匀)，2μLTaqDNA聚合酶，2μL模板DNA。在PCＲ扩增仪上进行以下程序:94℃3min;94℃30s，65℃30s，72℃30s，35个循环;72℃延伸7min。将PCＲ产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，见图3，三份送检病料均扩增出猪伪狂犬病病毒条带，表明患猪被猪伪狂犬病毒感染。
8处置情况
对发病阶段猪群紧急接种武汉科前动物生物制品有限责任公司伪狂犬HB－98株3头份，并采取消炎退烧措施，经2～3d后病情逐渐好转，食量增加，眼脸肿胀情况逐渐消退，病重者则给予淘汰。
9分析与思考
1)伪狂犬病例从2012年上半年已经开始呈明显上升趋势，且发病猪群以中大猪为主。临床表现为发热、咳喘、后驱瘫痪等现象。根据畜主反映，大多数猪场母猪群采用伪狂犬疫苗普防，一般每3个月1次。育肥猪从出生到出栏一般只做2次免疫。使用的疫苗以国产疫苗为主，也有进口疫苗，但发病场与疫苗的选择无直接关联。
2)笔者分析，PＲV属于DNA病毒，一般不会发生变异或重组，因此临床出现的PＲ问题，是由于多年免疫后，PＲ临床症状减轻，导致一些猪场对PＲ不免疫或不重视;也有可能是疫苗质量不佳，疫苗中抗原含量不达标，由此产生的免疫失败所致;部分场由于圆环病毒2型(PCV－2)、猪繁殖与呼吸障碍综合征(PＲＲS)等免疫抑制性疾病的存在，导致猪伪狂犬疫苗无法产生有效预防效果。
3)据笔者观察，发生伪狂犬疫情的猪场，及时明确病因，更换疫苗或加大免疫剂量，可以产生较好的控制效果。在伪狂犬病有抬头上升的趋势下，养殖场更应从4个方面做好预防控制工作:
第一，控制传染源。养猪场购入公猪或母猪时，应详细了解当地的疫病流行、免疫接种等情况，认真查看畜禽产地检疫证明和免疫档案，要进行隔离饲养、观察检疫，确定为健康猪后，方可混群管理。
第二，生物安全措施要执行。坚持严格的消毒制度，保持清洁卫生，营造良好的养殖环境。一定要有严格的灭鼠措施，消灭鼠类带毒传播疾病的危险。
第三，疫苗操作规范。首先种猪与商品猪的疫苗最好选择同一家企业的产品。10头份一瓶的基因缺失疫苗，要用7mL稀释液稀释，猪的每个鼻孔滴5滴，切不可用上全部稀释液。滴鼻时一定要用软瓶滴，不要用注射器滴，用注射器不好掌握，滴速过快容易呛死猪，出生当天滴，滴鼻免疫不能代替母猪产前免疫，推荐伪狂犬免疫程序:母猪配种前做1次灭活苗，母猪产前第30天再做1次灭活苗，仔猪出生当天滴鼻免疫。肥猪在70日龄时再肌注1次活苗。阳性不稳定场，建议肥猪进行3次伪狂犬免疫，防止对种猪群的威胁。
第四，发生过伪狂犬疫情的猪场，使用鉴别诊断试剂盒定期对种猪群进行监测，淘汰阳性种猪;对后备种猪进行监测，阳性者进行育肥处理。
(信阳农林学院，刘涛;唐河六和饲料公司，王举才)
