3数据统计
检测结果数据用 Excel 进行统计分析处理。
4结果
A 种猪场挑选 50~70 日龄 300 头保育猪，单独隔离饲养 1 个月经检测合格后转至 B 种猪场隔离饲养 20 d， 隔离经检测合格后方能转入 B 种猪场生产区。分别于 70 日龄 （引种前 1 个月） 、 91 日龄 （引种前 1 周） 、 120 日龄（隔离 20 d 后） 、 150 日龄、 180日龄、 210 日龄、 330 日龄 （妊娠 84 d ） 和产后 15 d 母猪群全群采血以及所产 15 日龄哺乳仔猪每窝随机选 5 头采血，按要求检测 PRRSV 抗体与抗原、 PRVgpI 抗体。具体检测结果见表 2、 表 3。
由表 2 结果可知， B 种猪场引入的种猪于 120日龄 （于 B 种猪场隔离 20 d） 和 180 日龄出现蓝耳病抗体 S/P 值大于 0.4 情况即蓝耳病抗体阳性， 结合蓝耳病抗原检测或重复采蓝耳病抗体阳性猪只血液再次检测蓝耳病抗体，结果蓝耳病抗原检测呈阳性或再次检测蓝耳病抗体 S/P 值大于 0.4 的猪只立即淘汰，切断携带蓝耳病病毒的带毒猪在猪群散毒。
由表 3 可知， 种猪群及其所产哺乳仔猪呈现伪狂犬病野毒 gpI 抗体阴性状态，说明 B 种猪场整个猪群未受到伪狂犬病野毒株感染。通过对 91、 120、 210 和 330 日龄所有母猪群采血检测 PRRSV 抗原发现，于 120 日龄出现 1 头猪PRRSV 抗原阳性， 并与 120 日龄 PRRSV 抗体检测阳性结果相符合，因此及时淘汰了 120 日龄PRRSV 抗原和抗体双阳性的猪只 1 头，有效阻止蓝耳病病毒在猪群间传播。其他日龄检测 PRRSV抗原均呈现阴性， 说明 B 种猪场种猪群蓝耳病呈抗
原阴性状态。
5讨论
从对 B 种猪场猪群蓝耳病抗体和抗原监测结果来看， 一个蓝耳病阳性场通过净场、 彻底消毒、 干燥空置、 喷氢漆及优化生物安全标准等措施， 并结合实验室 ELISA 和 PCR 法剔除蓝耳病抗体或抗原阳性猪只， 及时切断蓝耳病病毒的循环传播后， 完全可以将蓝耳病阳性场转为蓝耳病阴性场。现将现场技术详列如下。
5.1猪场内 PRRSV 清除
根据 B 种猪场 2012 年前情况， 该场受蓝耳病病毒感染严重， 因此在引入新种猪前必须确保 B 种猪场内的蓝耳病病毒彻底清除。 采取的具体措施包括：
1 ） 将原有蓝耳病阳性猪群全部转移；
2 ） 按常规清理猪舍方法将所有猪舍清理干净；
3 ） 整理猪场内各个区域杂物或废旧设备工具等；
4 ） 检查并统计猪场内需要维修或更换的设备与工具，然后按清单完成；
5 ） 对整个猪场各区域再次进行彻底冲洗 （添加美国硕腾公司洗百健） ， 细化到将猪舍内栏位、 产床拆卸后清洗；
6 ） 清洗完后， 猪舍内用百胜 （1∶200 ） 彻底消毒，猪场外环境使用 3%火碱和季铵盐类消毒药交叉消毒；
7 ） 1 周后，用火焰枪往猪舍内各死角处喷，彻底杀灭病原；
8 ） 若舍内产床、 栏位等设备较旧时，此时可以喷一层氢漆，这样既可以防止设备生锈老化又可以覆盖病原将其杀灭；
9 ） 待所有区域均整理完毕后， 整个猪场干燥、 空置 1~3 个月 （最好安排在炎热季节 ） ；
10 ） 引猪前 2 周准备好饲料和疫苗等， 并做好熏蒸消毒或紫外线照射消毒工作；
11） 引猪前1周再次用百胜或卫可 （1∶200 ） 对猪舍消毒， 猪场外环境用 3%火碱消毒；
12 ） 引猪前检查供水系统， 并安排好接猪等工作。
5.2生物安全标准
根据 B 种猪场实际生产情况，制定相应的生物安全防疫标准措施。 实际生产中严格按照标准执行，才能杜绝蓝耳病病原进入猪场感染猪群，确保猪群保持蓝耳病抗原与抗体双阴性状态。生物安全要考虑到的因素包括： 出入猪场员工或访客、 运输车辆、饲料兽药疫苗、 日常用品、 设备工具、 病死猪、 夏季蚊虫苍蝇、 水质、 后备猪及精液供应等， 采取的具体措施如下：
1 ） 制定兽医职责以及员工工作、 休假及隔离制度、 生产管理等标准；
2 ） 运输车辆管理： 仅仅依靠单纯的冲洗消毒仍不够，外来车辆务必在指定地点干燥停置 8 h 以上；
3 ） 人员管理： 明确场内员工进入生产区必须沐浴更换专用工作服，员工进出场休假需请假隔离，外来访客或客户一般不允许进入生产区；
4 ） 物资管理： 从外面所买的物资， 尤其是兽药和疫苗可能存在和其他猪场交叉感染情况，务必放于猪场内专业缓冲间进行熏蒸或紫外线照射消毒；
5 ） 后备猪与精液管理： 引入种猪后， 所有后备猪均由自身选留， 不再引入新的种猪； 猪场所用精液为本猪场蓝耳病阴性公猪或 SPF 种公猪站所提供的蓝耳病阴性精液，所用精液定期进行 PRRSV 抗原检测； 6 ） 场内外消毒工作： 每周消毒 3 次 （周一、 三、 五 ） ， 大风过后及时增加消毒工作； 7 ） 水： 定期对饮用水进行病原检测， 确保无特定病原体； 8 ） 优化综合饲养管理： 分别从生产、 人员、 技术以及疾病防控等方面进行。
5.3实验室检测
为建成蓝耳病阴性种猪群，前面分别对 B 种猪场进行清理， 在 A 种猪场挑选蓝耳病阴性种猪并做好引种及隔离饲养工作，引种后制定严格的生物安全标准并认真执行， 再借助实验室 ELISA 和 PCR 方法对猪群的 PRRSV 抗体与抗原、 PRV gpI 抗体检测来淘汰蓝耳病阳性猪， 阻止蓝耳病病毒在猪群内传播感染。 最后通过 ELISA 和 PCR 方法检测整个猪群的 PRRSV 抗体与抗原， 结果呈现双阴性状态。从而验证： 由一个蓝耳病阳性稳定场引入种猪， 并通过优化生物安全措施，来建立一个蓝耳病阴性种猪群的技术是可行的。
6结论
北京养猪育种中心 B 种猪场 （中荷种猪场 ） 种猪群及所有生长群均保持 PRRSV 抗体和抗原双阴性、PRV gpI 抗体阴性状态。结合 A 种猪场和 B 种猪场背景、 猪群的蓝耳病状态， 通过净场并优化生物安全防疫措施，建立蓝耳病阴性种猪群的技术是完全可行的。
