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伊维菌素注射液含量的测定法

发布时间:2014-09-12 15:54    作者:yizhiinfo    来源:畜牧人才网    查看:
0引言

     伊维菌素为抗生素类药,含有两种有效成分,即含有多于80%的22-23-双氢埃维菌素B1a和少于20%的22-23-双氢埃维菌素B1b。伊维菌素注射液对线虫、昆虫和螨均具有驱杀作用,其含量测定《中国兽药典》(2000年版一部)采用高效液相色谱法,该方法测定结果准确,但对实验设备要求高,一般兽药厂难以达到。经采用紫外分光光度法测定伊维菌素注射液中伊维菌素B1含量,操作简便、快速,结果满意。该方法对市场快速检测,生产厂家质量监控具有实用价值。

1食品与试剂

     美国UnicamUV-300型紫外分光光度计;伊维菌素原料、伊维菌素注射液由武汉光牧生化科技有限公司提供;伊维菌素对照品来源于中国兽药监察所,批号KY31297;甲醇为分析纯。

2方法与试验结果

2.1伊维菌素备用溶液的制备

     取伊维菌素约40mg,精密称定,置100mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀即得。

2.2伊维菌素紫外吸收曲线

     吸取上述备用液3mL,置100mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,于200~400nm绘制紫外吸收图谱,在238nm、245nm有最大吸收,其中245nm处吸收度最大,

2.3伊维菌素紫外吸收标准曲线的制定

     取伊维菌素备用液,分别用甲醇稀释成4.0、8.0、12.0、16.0、20.0、24.0、28.0μg/mL溶液,用甲醇作空白,于1cm石英比色池中,在245nm处测定其吸收度,得标准曲线:

     C=26.5404A-0.5323r=0.9999

     结果表明:伊维菌素B1浓度在4.0~28.0μg/mL范围内时与吸收度呈良好线性关系,符合朗伯-比尔定律。

2.4空白试验

     加处方比例的溶剂适量,按上法操作,在245nm处测其吸收度,符合《中国兽药典》(2000年版)要求。

     精密称取伊维菌素适量(约含伊维菌素B140mg)与处方比例的溶剂4mL,置50mL容量瓶中,加甲醇定容,摇匀。精密吸取2mL,用甲醇稀释至100mL,摇匀,于245nm处测定吸收度,另取伊维菌素对照品,按上法同样操作,根据二者吸收度比值计算伊维菌素B1含量。5次测定结果回收率在99.81%~100.31%之间,平均回收率为100.06%,RSD为0.21%(n=5)。结果见表1。
  
2.5稳定性试验

     取回收试验项下溶液,在室温、暗处存放不同时间,依次于245nm处测定吸收度,结果见表2。
  
     由表2结果可见,伊维菌素4h内吸收度基本保持不变,4h后测各溶液吸收曲线,峰形、λmax均保持不变。

2.6样品的测定

2.6.1紫外法

     精密吸取伊维菌素注射液4mL(为伊维菌素40mg),置50mL容量瓶中,加甲醇定容,摇匀,精密吸取2mL置100mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,于245nm处测定吸收度,另取伊维菌素对照品,按上法同样操作,根据二者吸收度比值计算。

2.6.2高效液相色谱法

     精密吸取伊维菌素注射液4mL(为伊维菌素40mg),置200mL容量瓶中,加甲醇定容,摇匀,按《中国兽药典》(2000年版一部)伊维菌素注射液含量测定方法操作。结果见表3。
  
3小结

     (1)采用紫外分光光度法测定伊维菌素注射液中伊维菌素B1含量,操作简便,快速,重现性好,结果满意。

     (2)伊维菌素注射液用高效液相法,可定量检测伊维菌素B1a和B1b;本文方法可定量检测伊维菌素B1(B1a+B1b),适用于生产单位对该产品及中间体的含量控制。

(辽宁省辽中县,孙永泰)

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