马超锋 张轶 高均伟 刘涛 王瑞
信阳市动物疫病预防控制中心
信阳农林学院动物科学系
猪瘟一旦暴发, 对养猪业可造成巨大的经济损失, 世界卫生组织 (OIE ) 将猪瘟列为 A 类传染病, 我国将其列为一类动物传染病。目前,仍有很多国家和地区有猪瘟流行,近年来在一些宣布消灭猪瘟的国家也相继复发,我国一些地区的猪瘟发病率也呈上升趋势[1]。目前, 猪瘟尚无特效药物治疗, 为有效控制猪瘟,国家对猪瘟实行强制免疫措施。为了解信阳地区猪瘟免疫状况,信阳市动物疫病预防控制中心组织相关人员历时 1 年,对信阳地区规模养殖场的猪瘟防疫状况进行了深入的调查分析, 掌握了信阳市猪瘟免疫状况的第一手资料,以期为该病防控提供参考。
1材料与方法
1.1样品采集
2013 年 2—12 月, 从信阳地区的罗山县、 潢川县、 光山县、 商城县、 息县、 新县、 浉河区、 平桥区和淮滨县 90 家规模养殖场,选取不同日龄健康猪群, 通过前腔静脉或耳静脉无菌采集全血 3~5 mL, 共采集血样 3 677 份, 冷藏条件下送实验室。
1.2样品的制备
将采集的血液样品于 4 000 r/min 条件下离心5min,取上清液于 1.5 mL 灭菌离心管中, -20 ℃保存待检。
1.3检测试剂盒及仪器设备
1.3.1检测试剂盒
猪瘟病毒抗体检测试剂盒(A631 ) , 购自美国 IDXX 公司。
1.3.2仪器设备
TDZ5-WS 台式低速离心机 (长沙湘仪离心机仪器有限公司) , 303 系列电热恒温培养箱 (上海树立仪器仪表有限公司 ) , ELX-800 全自动定量绘图酶标仪 ( 美国BIO-TEK ) , Eppendorf10~1000μL单道移液器及 25~300 μL 多道移液器 (德国 Eppen-dorf 公司 ) 。
1.4试验方法
(1)猪瘟抗体检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA ) , 按照国家标准 GB/T 16551—2008 进行。猪瘟抗体 ELISA 检测方法判定标准:只有阴性对照的平均 OD450大于 0.5,阳性对照的阻断率大于50%, 该检测结果才能有效。如果被检样本的阻断率大于或等于 40%, 该样本就可以被判为阳性; 如果被检样本的阻断率小于或等于 30%, 该样本就可以被判为阴性;如果被检样本的阻断率在 30%~40%之间, 就应在数日后再对该动物进行重测。如果重测结果仍为可疑, 可使用血清中和试验方法确认。
(2 ) 群体免疫抗体阳性率达到 70%判定为群体合格。
1.5统计分析
检测结果采用 SPSS16.0 软件进行分析, 通过 X2检验分析差异显著性, P<0.05 表示差异显著, P<0.01表示差异极显著。
2检测结果
2.1信阳地区不同县区猪场猪瘟抗体水平调查
通过表 1 可以看出, 本次调查的 90 个规模化猪场,检测样品 3 677 份,合格 2 777 份,合格率75.5%;以县区统计,平桥区样品合格率最高, 达85.5%, 商城县最低为 69.3%。
2.2 2013 年信阳地区不同月份猪瘟抗体合格情况
从表 2 可以看出,全年 9 个月抗体合格率在70%以上,其中 6 月和 10 月较高,达到 82.1%和79.9%; 1 月、 2 月和 12 月抗体合格率较低, 没有达到70%合格标准。
3分析与讨论
3.1信阳地区不同县区间猪瘟抗体水平差异极显著
本次猪瘟免疫状况调查覆盖信阳辖区内所有县区的 90 个较大规模猪场,检测样品 3 677 份, 能够较全面地代表信阳市猪瘟的整体防疫状况。本次调查检测的 3 677 份样品中, 阳性数 2 777 份, 阳性率为 75.5%, 高于 70%的群体保护率标准, 这与刘涛等[2]在 2012 年对信阳地区猪瘟免疫调查的合格率54.79%相比要高, 与曲哲会等[3]调查的豫南地区合格率 76.24%相近, 与王辉[4]检测的河南省郑州市猪瘟抗体合格率 75.5%相同, 远低于赵雪丽等[5]2010年对河南省猪瘟调查的合格率 95.78%和方先珍等[6]对河南省规模猪场猪瘟抗体水平监测的合格率91.4%。与国内其他省份相比, 比 2012 年合肥地区的合格率 59.35%[7]、 2012 年湖南规模猪场的合格率55.8%[8]、 2011 年四川部分地区规模化猪场的合格率68.68%[9]要高; 与 2013 年新疆石河子地区的合格率78.5%[10]、 2013 年山东中小规模猪场合格率 76.2%相近[11]; 低于 2010—2012 年浙江省部分地区规模猪场猪瘟抗体平均免疫合格率 80.44%[12]。对信阳市七县两区猪瘟抗体水平进行 X2检验分析差异显著性, 结果 P<0.01, 表明不同县区间猪瘟抗体合格率差异极显著。 其中, 平桥区抗体合格率最高, 达 85.5%, 商城县最低为 69.3%。
3.2信阳地区猪瘟免疫效果具有明显的季节性
从表 2 可以看出, 信阳地区猪瘟的免疫效果随月份不同抗体合格率有明显变化。对不同月份猪瘟免疫抗体合格率进行 X2检验分析差异显著性,P=0.001<0.01,表明不同月份猪瘟抗体水平差异极显著; 其中, 6 月、 10 月、 11 月抗体合格率相对较高,分别为 82.1%、 79.9%和 77.7%; 12 月、 1 月、 2 月抗体合格率较低,分别为68.0%、68.4%和67.0%,低于国家70%群体合格率标准, 表明此期对整个猪群保护力不够,猪群存在猪瘟野毒感染的风险。本次调查发现,猪瘟抗体合格率较高的月份在6月、10月和11月, 分析原因可能与这个时间段大多数养殖场对猪群进行猪瘟普免有关,另外气温也比较适合猪的生长, 环境应激因素降到了最低。
3.3提高猪群猪瘟免疫效果的措施
《河南省中长期动物疫病防治规划 (2012—2020年 ) 》 要求河南省所有种猪场到 2020 年要净化猪瘟,猪瘟的防控工作任重道远。要净化和根除猪瘟, 猪场需要加强对该病的防疫,建议采取如下措施:
1) 疫苗的免疫接种要严格按照说明书进行, 免疫注射时, 要轻逮轻放;
2 ) 提高猪群的免疫力和抗应激能力。在免疫前后,给猪群的饮水或饲料中添加黄芪多糖、植物血凝素和蜂灵散等免疫促进剂促进猪群的免疫应答, 添加适量的电解质多维等营养性调节剂以提高抗应激能力;
3 ) 要加强对防疫人员的培训, 确保免疫效果和免疫密度;
4 ) 实施抗原检测并淘汰带毒猪。