孟玉学 杨为敏 河南省汝州市职业中专
许多养鸡场在遭遇禽流感重大损失时， 才想起做禽流感组织苗。 禽流感组织苗，从原理上讲，就是将死亡鸡的一些器官组织取下， 磨碎冻融灭活后制成灭活苗，制作简单又适合紧急情况使用。但实际生产活动中，却很少能推广开来，这是为什么呢？
1病毒量太少，不能适应免疫需要
强毒株禽流感造成鸡的快速死亡时， 特别在攻击心、肺、肝、脾、肾、脑等主器官时，病毒量并不需要太大量， 强毒株的参照标准是用鸡胚复制出的病毒尿囊液稀释 10 倍后每只鸡接种 200ml，10d内 8 只 6～8 周龄内的鸡死亡 6 只以上或者病毒基因中有特定的碱基则为强毒。 强毒株如果做犬肾细胞实验时， 它的半数感染量一般是一代或二代病毒的几十分之一到百分之一， 如果毒力更强则能达到几百分之一。 这些病毒的量很难达到疫苗要求的量（26~29的血凝价）。 很多快速死亡的鸡身上的病毒甚至小于 2-5血凝价，而且病死鸡身上的病毒在毒力越强时，病毒量反而会越少，远远不足以产生免疫需要的抗体，甚至不能产生野毒抗体。这是组织苗应用很不理想的最主要原因。 组织苗还有个最大的不利之处就是组织中的病毒量是确定的，无法复制和扩增，对大量的需要也有很大的限制，上哪里去找那么多合适的病死鸡呢？检测组织病毒的方法， 可以使用胶体金试纸法、酶联吸附试验法（ELISA）和链式反应基因扩增法（PCR），如果使用 PCR 法，可以使用半定量法、梯度 PCR 法和定量 PCR 等多种方法。
2病毒灭活不彻底，极易产生灾难性后果
禽流感灭活苗的最大要求就是要将病毒全部杀死，一些组织苗因为没有完全灭活，导致打苗行为变成了野毒接种过程， 出现大批死亡的严重事故， 从事故分析的角度来看， 造成这种情况的原因，一般在于两种情况，一是病料的研磨和组织捣碎不彻底，有的制作根本没有使用组织捣碎机；二是组织细胞冻融或反复冻融不彻底， 导致细胞没有完全崩解，病毒粒子没有完全释放出来，这些情况都能造成病毒仍在组织细胞内， 根本没有释放出来，所以灭活时，隔着组织或细胞，病毒根本没有接触到灭活用的甲醛或 β-丙内脂等灭活液，自然还会有感染能力， 接种过程也就成了感染野毒的过程。 而自然感染野毒时有的鸡感染多，有的鸡就感染少或者没有感染， 而免疫接种野毒则一只鸡也跑不了， 这样的接种损失往往比野毒感染还要惨重。 这种情况下，如果是场家自救性质，则自己对自己的行为负责，如果没有严格的技能，却用这种方式主动承担其它鸡场的禽流感防控， 一旦出事，就会出现双方都不愿意看到的情况，甚至出现很大纠纷。
3病料中的细菌混合感染
当前，因禽流感而发病的鸡，常常有细菌混合感染。 病毒的灭活浓度常常杀不死细菌，一般来说病毒的灭活浓度比细菌灭活浓度低 4 倍， 所以病毒灭活了，而细菌却没有被灭活，打这种组织苗就会出现细菌感染的情况，比如打苗后，鸡群细菌感染增加，剖检发现细菌感染比例增加等。 而如果用细菌的灭活浓度制苗给鸡打， 大量的甲醛就会严重影响蛋鸡的产蛋率，引起比较大的产蛋下降。 据了解， 我国疫苗厂发生的最严重的禽流感疫苗甲醛超标的原因，也是由于细菌污染所致，其疫苗中检测到甲醛浓度为标准的 6 倍以上。
综合以上原因， 禽流感组织苗由于先天不足以及各种制约因素， 所以并不适合用于禽流感的防控。 也有的用户会说，我做过这个东西，效果还不错。 实际上，做了这个苗后，它有效无效，一是可以用对应的野毒检测一下， 看它有没有产生相应滴度的野毒抗体，这样做比较确切；二是可以做一个攻毒实验，看实验鸡群能否抵抗野毒的攻击，如果没有产生相应滴度的抗体， 也不能抵抗野毒的攻击，那这个组织苗做的很失败，实际上，组织苗打一次即使产生了抗体，也是比较低的，要想抗体高，还需多次注射免疫，这在养殖户里很少见，一般都是打一次就拉倒了 （就是国家标准苗也需要多次免疫，不是一次就行），所以能够产生抵抗野毒攻击的可能性一般都很低。 有些养殖户打了一次组织苗没有出事，就认为此苗效果很好，有时不过是野毒在鸡舍没有二次传播， 或者鸡群没有遇到禽流感的二次流行而已。 当然，如果禽流感组织苗能产生较少的抗体， 也能产生一定的相应的较少的抵抗作用， 野毒抗体的效能一般要比疫苗标准株高。
4较好的做法
如果您的养殖场规模大，投资规模也大，在正规的疫苗并不能保护您庞大的鸡群安全时， 较好的做法是： 可以将本场或附近场正流行的病毒分离出来，利用鸡胚或细胞（如犬肾细胞 MDCK）进行复制，产生足够量的病毒，而且相对来说，很纯净，灭活起来也很简单，利用鸡胚或青年鸡检测安全性后，再做油苗，其有效性和安全度就能够得到较好的保证。 当地流行株做的疫苗，只要毒株的免疫原性没有问题， 其效能比当然比正规的标准毒株要高，效果也比标准株好。
