血液生理生化指标是动物生理状态和机体健康状况最直观的反映,而免疫指标则体现了机体的免疫状态和抗病力,这些都是兽医临床诊断疾病、防治疾病不可缺少的重要依据,也是生理学、免疫学、病理学等研究的重要参考指标。研究荣昌猪不同性别的血液生理生化及免疫指标的变化情况及其差异,确定荣昌猪血液生理生化及免疫指标正常参考数据,对于进一步探究荣昌猪的品种特性,促进在畜牧生产和生物医学研究上的开发利用有着重要的意义。目前,系统研究我国地方猪品种血液生理生化指标特性的报道多见于小型猪,如五指山猪、巴马香猪、合作猪、藏猪、滇南小耳猪等,也有太湖猪、清平猪、莆田黑猪、皖南花猪等其地方猪品种。王孝友等测定了1~4月龄荣昌猪仔血液生理生化指标,并与国内部分地方猪种和人进行了比较。廖均华等曾测定了生长猪、妊娠和泌乳母猪、公猪的部分血液生理指标。蒋茂成等曾测定了成年荣昌阉公、母猪,双月龄仔猪的12项生化指标。但目前7月龄以上成年荣昌猪种猪的血液生理生化及免疫指标数据还明显不足,有待进一步完善。本研究通过对不同性别成年荣昌猪种猪血液生理生化及免疫指标进行测定分析,为荣昌猪进一步作为实验动物提供可靠的基础研究数据。
1 材料与方法
1.1 试验动物
在重庆市畜牧科学院荣昌猪国家级资源保护场保种核心群中随机选取7月龄以上成年荣昌猪种猪32头。其中,种母猪20头(妊娠期12头,哺乳期8头):10~11月龄2头,1~2年4头,2年以上14头;种公猪12头,全部为已配种公猪:7~11月龄4头,1~2年5头,2年以上3头。
1.2 饲料配方及营养成分
采用玉米-豆粕型日粮,饲料原料组成及营养成分见表1。

1.3 饲养管理及免疫程序
开放式猪舍,水泥地板。采用全价配合饲料,每日人工加料2次。试验猪自由采食,自由饮水。每日清扫圈舍2次,保持地面清洁。按猪场常规程序免疫,即每年2、3、8月分别免疫猪乙脑、猪瘟、猪伪狂犬疫苗。
1.4 血样采集
用5 mL一次性注射器前腔静脉取血4~5 mL,立刻向2mL EDTA.K2抗凝血真空管注入血液2mL,并颠倒混匀数次,用于血常规检查;留有2~3mL非抗凝血的注射器倒置2~3 h后将上清转入2 mL灭菌离心管中,1000×g离心20min取血清分装并存于-20℃冰箱备用,用于生化和免疫指标的测定。
1.5 测定指标
血液生理指标(13项):白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)、红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)、血小板(PLT)、血小板平均体积(MPV)、血小板压积(PCT)和血小板分布宽度(PDW)。
血清生化指标(12项):谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(GLU)、尿素(UREA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)和载脂蛋白AⅠ(APOA)。血清免疫指标:免疫球蛋白GIgG)和免疫球蛋白M(IgM)。
1.6 测定方法
抗凝血送至重庆市荣昌县人民医院检验科,利用SYSMEX公司生产的全自动血液分析仪(Sysmex XT-2000i)测定各项血液生理指标;血清利用日本日立公司生产的全自动生化仪(automatic biochemical analyzer, Hitachi 7020)常规操作测定各类生化和免疫指标。
1.7 统计分析
应用SPSS19.0软件进行统计分析,组间比较采用t检验。结果均以平均值±标准差表示。
2 结果
2.1 荣昌猪血液生理指标测定结果

由表2可知,荣昌公猪的RBC、HGB、HCT均高于荣昌母猪(P<0.01),而WBC正好相反(P<0.01)。荣昌猪其他生理指标在性别间无显著差异(P>0.05)。
2.2 荣昌猪血液生化指标测定结果
由表3可知,荣昌公猪的血清ALB、碱性磷酸酶ALP和葡萄糖GLU均极显著或显著高于荣昌母猪(P<0.01 或 P<0.05),而血清ALT、APOAⅠ均极显著和显著低于荣昌母猪(P<0.01 or P<0.05)。荣昌猪其他生化指标在性别间无显著差异(P>0.05)。

2.3 荣昌猪血液免疫指标测定结果
由表4可知,荣昌猪血清IgG、IgM在性别间无显著差异(P>0.05) 。

3 讨论
3.1 荣昌猪及其他猪种血液生理生化及免疫指标
性别间的差异作为生物医学研究的重要基础指标之一,猪的血液生理生化指标受品种、年龄、性别、生理状态和生活环境等因素的影响,具有一定的变异度。本研究测定的荣昌猪13项血液生理指标中,MCV等9项在性别间无显著差异,这与在藏猪、莆田黑猪、剑白香猪、五指山猪、合作猪、太湖猪中研究结果基本一致。另外,RBC、HGB、HCT和WBC 4项指标在性别间有显著差异,且前3项指标荣昌公猪均极显著高于荣昌母猪,后1项指标荣昌母猪极显著高于荣昌公猪。廖均华等比较成年荣昌公猪与空怀期母猪的RBC和HGB,结果与本研究相似。李波等测定了8~12月龄滇南小耳猪的血液生理指标,发现RBC、HGB和红细胞压积HCT在性别间也有显著差异,但公猪低于母猪。而其他地方猪种在上述4个差异指标上均未发现有性别差异。
本研究测定的荣昌猪12项血液生化指标中,AST、UREA、LDL-C、TP、TC、TG、HDL-C 7项指标无显著的性别差异,而ALT、GLU、ALB、ALP、APOAⅠ 5项指标存在显著或极显著的性别差异。与其他中国地方猪种比较,不同指标在不同猪种中研究的结果并不一致:如TC在荣昌猪中未表现显著的性别差异,这与在藏猪、五指山猪和安庆六白猪中研究结果一致,而在莆田黑猪、合作猪和皖南花猪中却表现显著的性别差异;ALP在荣昌猪中均表现出显著的性别差异,荣昌公猪ALP极显著高于荣昌母猪,这与在藏猪中研究结果一致,但在莆田黑猪、五指山猪和合作猪中未表现显著的性别差异。
免疫球蛋白是存在于动物血液、组织液及其他分泌液中的一类具有抗体活性的球蛋白,通常分为五类:IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。其中,IgG是人和动物血清中含量最高的免疫球蛋白,是介导体液免疫的主要抗体。血清中IgG含量可以反映血清中抗体的主要部分,代表了机体体液免疫的状态。IgM是初次体液免疫反应中最早出现的免疫球蛋白,在感染初期发挥着先锋免疫作用。本研究测定了成年荣昌猪血清IgG和IgM,发现2个指标在性别间均无明显差异。而盛晟等测定不同日龄皖南花猪血清IgG和IgM,发现母猪血清IgG在45d和90d大于公猪,而在0、30、180d时性别间均无明显差异; 血清IgM在各日龄阶段均有显著的性别差异,母猪显著大于公猪。
综上所述,与国内其他地方猪种相比,荣昌猪血液生理生化及免疫指标在性别间的差异既有一致性又有差异性。这也进一步表明荣昌猪既有地方猪种的共有特性,又有其独特的品种特性。
3.2 荣昌猪血液生理生化指标与小型猪及人类比较
由于具有体型较小、易于实验操作、易于微生物控制、饲养成本低等优点,小型猪日益成为生命科学研究中的重要实验动物。我国拥有小型猪品系资源丰富,包含了2个资源品系、7个封闭群和2个近交培育系。与我国主要的小型猪相比,荣昌猪的WBC、MCV、MCH、ALB和TP测定平均值与封闭群五指山小型猪接近,RDW-CV测定平均值与近交系五指山小型猪接近,RBC、HGB、PDW、MPV、AST和ALB测定平均值与广西巴马小型猪接近,MCHC、ALT、TP和TC测定平均值与贵州小型猪接近,而HCT、PLT、UREA和GLU测定平均值均小于上述4个小型猪。研究表明,封闭群五指山小型猪、近交系五指山小型猪、广西巴马小型猪和贵州小型猪分别有8项、5项、9项、8项血液生理指标处于人类血液生理正常参考指标范围内,分别有6项、8项、6项、8项血液生化指标处于人类血液生化正常参考指标范围内。
本研究结果显示,13项荣昌猪的血液生理指标有7项的平均值处于人类血液生理正常参考指标范围内,可比较的9项荣昌猪的血液生化指标有4项的平均值处于人类血液生化正常参考指标范围内。该结果说明荣昌猪和人的血液生理生化特性存在一定的相似性,可以应用于比较医学、药物测试等方面的生物医学研究。
4 结论
通过系统研究成年荣昌猪不同性别血液生理生化及免疫指标的变化情况及其差异,确定了荣昌猪血液生理生化及免疫指标的基础数据,为探究荣昌猪的品种特性及其在畜牧生产和医学研究上进一步利用提供了参考。荣昌猪和人的血液生理生化特性存在一定的相似性,是理想的医学研究用实验动物。
(重庆市畜牧科学院 白小青、张凤鸣、张亮、陈英、涂志;农业部养猪科学重点实验室 白小青、张亮;重庆市养猪工程技术研究中心 白小青、张凤鸣、张亮)